mypols Direct Oral Swab 2xPCR Master Mix

€390,00

不再需要DNA分離
-Direct Oral Swab 2x PCR Master Mix使您可以直接進行PCR，而無需任何先前的DNA提取步驟中的繁瑣步驟。只需直接從唾液或頰拭子樣本中進行基因分型或病原體檢測測定即可。

Direct Oral Swab 2x PCR Master Mix包含HiDi Taq DNA聚合酶，因此，它在需要高單核苷酸區(qū)分性的所有分析中也很熟練，例如在PCR等位基因特異性擴增（ASA）中。HiDi Taq DNA聚合酶可從3'末端匹配的引物有效擴增，并區(qū)分錯配的引物。

該試劑盒配有優(yōu)化的緩沖液系統(tǒng)和用于唾液樣品的單獨裂解緩沖液。

應(yīng)用領(lǐng)域：

-直接從唾液樣本中進行PCR-直接從唾液樣本中進行
病原體檢測
-基因分型和基因組分析
-通過等位基因特異性擴增（ASA）/等位基因特異性PCR進行SNP檢測-直接從唾液樣本中進行
-HLA基因分型
-終點PCR- 
真實使用基于熒光的水解探針

進行實時PCR 當添加合適的實時染料（例如GreenDye（＃2000）或熒光探針）時，所有HiDi產(chǎn)品也都適用于實時循環(huán)。

Direct Oral Swab 2xPCR Master Mix也可以作為5'-3'核酸酶用于水解型探針（例如TaqMan）。

我們建議設(shè)計具有較短擴增子長度（約60-200 bp）的引物，以獲得良結(jié)果，但也可以使用更長的擴增子長度。如果更長的擴增子> 500 bp，可能需要添加額外的氯化鎂（+ 0.5-1.5 mM）。

PCR活性：測試直接口服拭子2x PCR Master Mix的成功等位基因特異性PCR性能，檢測唾液樣品中人基因組DNA中的基因組SNP（rs72921001）。隨后在2.5％瓊脂糖凝膠上分析PCR產(chǎn)物。通過在匹配的引物的右側(cè)擴增子長度為109 bp的溴化乙錠染色中觀察到特定產(chǎn)物。在錯配引物的情況下，在40個循環(huán)后沒有可見的產(chǎn)物形成。

DNA聚合酶活性：已使用人工DNA模板和DNA引物對HiDiTaq DNA聚合酶活性進行了監(jiān)測，并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。

酶濃度已通過蛋白質(zhì)特異性染色確定。請通過info@mypols.de查詢有關(guān)特定批次濃度的更多信息。

在標準測試反應(yīng)中未檢測到污染。

漆設(shè)計實例

匹配與錯配核苷酸位于引物的3'末端，以獲得宜區(qū)分結(jié)果。

示例結(jié)果-無法說明口味

香菜：有些人喜歡食物，有些則討厭。在這里，我們正在檢測HeLa基因組DNA中的基因組SNP（rs72921001）。據(jù)報道，該SNP接近許多編碼嗅覺受體的基因。（參考：Eriksson N. 等人（2012年），“嗅覺受體基因附近的遺傳變異會影響香菜的偏好。”）

考慮到僅C等位基因特異性引物被延伸并在特定擴增子中產(chǎn)生，我們可以得出不喜歡香菜的遺傳易感性，因為該SNP與檢測香菜的肥皂味顯著相關(guān)。  

在實時染料存在下，從1 ng / µl HeLa gDNA中進行等位基因特異性PCR，表明僅擴增了C等位基因特異性引物。區(qū)分了A等位基因特異性引物，因此多50個循環(huán)都不能擴增。

隨后在2.5％瓊脂糖凝膠上分析PCR產(chǎn)物。通過溴化乙錠染色以109 bp的擴增子長度觀察特定的產(chǎn)物。