BioLamina是一家瑞典生物技術(shù)公司，業(yè)務(wù)遍及。我們提供廣泛的化學(xué)成分和無(wú)動(dòng)物成分的層粘連蛋白組合，用于多種應(yīng)用，包括多能細(xì)胞的可靠擴(kuò)增和特化細(xì)胞類(lèi)型的分化和維持，如肝細(xì)胞，骨骼肌細(xì)胞和不同的神經(jīng)細(xì)胞。

我們以的產(chǎn)品，能力，奉獻(xiàn)精神和服務(wù)而聞名和認(rèn)可，并將自己定位于細(xì)胞培養(yǎng)的前沿。我們的高科技產(chǎn)品有助于提高客戶的效率和科學(xué)突破，使他們開(kāi)啟醫(yī)學(xué)研究的新紀(jì)元。BioLamina的Biolaminins™是市場(chǎng)上僅有的原始全長(zhǎng)，人類(lèi)，重組層粘連蛋白細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)，我們的Biolaminin基質(zhì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)質(zhì)量的影響已經(jīng)在許多具有高影響力的期刊中得到科學(xué)驗(yàn)證。

BioLamina建立在科學(xué)基礎(chǔ)之上，具有基質(zhì)生物學(xué)的遺產(chǎn)和基于細(xì)胞培養(yǎng)的研究的豐富經(jīng)驗(yàn)。該公司成立于2009年，由Karl Tryggvason博士及其兒子Kristian Tryggvason博士共同創(chuàng)立。如今，該公司在生產(chǎn)，研發(fā)，物流，銷(xiāo)售和營(yíng)銷(xiāo)方面擁有約20名員工。我們的質(zhì)量體系符合ISO 9001：2015標(biāo)準(zhǔn)，管理層和員工均遵循明確的標(biāo)準(zhǔn)流程和協(xié)議。

BIOLAMININ 521 MX（MX521）

人重組層粘連蛋白521

重建天然細(xì)胞生態(tài)位是成功培育的關(guān)鍵。BM中不同層粘連蛋白同種型的物理，拓?fù)浜蜕锘瘜W(xué)表達(dá)是異質(zhì)的和組織特異性的。 

Biolaminin 521 MX（MX521）是多能干細(xì)胞的天然層粘連蛋白，因此可以在化學(xué)成分確定的無(wú)飼養(yǎng)細(xì)胞和無(wú)動(dòng)物成分的干細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中可靠地促進(jìn)人ES和iPS細(xì)胞的自我更新。MX521能夠?qū)z傳穩(wěn)定和多能干細(xì)胞進(jìn)行有效的單細(xì)胞傳代，無(wú)需任何細(xì)胞凋亡抑制劑，從而提高細(xì)胞質(zhì)量和研究質(zhì)量。 

出生后，α5-層粘連蛋白代表體內(nèi)常見(jiàn)的層粘連蛋白，MX521支持許多不同的組織細(xì)胞類(lèi)型，如來(lái)自胰腺，血管，神經(jīng)和肌肉系統(tǒng)的細(xì)胞。
 

BIOLAMININ 521產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

功能和規(guī)格：

• 研究級(jí)基材

• 動(dòng)物成分免費(fèi)到中學(xué)水平

• 生物學(xué)相關(guān)的文化環(huán)境

• 同源和遺傳穩(wěn)定的hPSC培養(yǎng)物

• 簡(jiǎn)單靈活的文化系統(tǒng)

• 一致可靠的性能

• 快速擴(kuò)大規(guī)模

• 輕松適應(yīng)自動(dòng)化平臺(tái)

• 支持周末免費(fèi)喂養(yǎng)制度

• 有效的分化和增強(qiáng)的細(xì)胞成熟，極化和組織

• 科學(xué)證明

生物相關(guān)的文化環(huán)境

Biolaminin 521 MX是一種全長(zhǎng)的人類(lèi)重組層粘連蛋白521底物，是市場(chǎng)上僅有的此類(lèi)底物，為hPSCs的無(wú)飼養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)提供了宜環(huán)境。層粘連蛋白521是天然干細(xì)胞生態(tài)位的關(guān)鍵細(xì)胞粘附蛋白，由胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中的hPSC表達(dá)和分泌。Biolaminin 521底物在體外重建了生物學(xué)相關(guān)的hPSC環(huán)境  ，促進(jìn)依戀，高生存率和強(qiáng)大的hPSCs長(zhǎng)期自我更新。此外，更真實(shí)的培養(yǎng)環(huán)境使多能干細(xì)胞更有效地分化，增強(qiáng)細(xì)胞成熟，極化和特化細(xì)胞類(lèi)型的組織。層粘連蛋白521細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)對(duì)hES細(xì)胞系之間的多能基因表達(dá)譜的穩(wěn)定和均質(zhì)化具有積極作用，與飼養(yǎng)細(xì)胞和許多其它無(wú)飼養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)相比，提供了更可控和更穩(wěn)健的培養(yǎng)系統(tǒng)。通過(guò)與相關(guān)細(xì)胞表面受體的相互作用，層粘連蛋白激活細(xì)胞信號(hào)級(jí)聯(lián)（例如PI3K / Akt途徑），提供一致的細(xì)胞反應(yīng)和改善的細(xì)胞功能，終節(jié)省研究人員的時(shí)間和成本。
 

MX521干細(xì)胞基質(zhì)可實(shí)現(xiàn)高膨脹率，單層均勻生長(zhǎng)，并保持多能性。細(xì)胞在遺傳上是穩(wěn)定的，沒(méi)有核型異常。與飼養(yǎng)細(xì)胞或其他無(wú)飼養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞相比，hESC和iPSC在MX521上生長(zhǎng)更快，促進(jìn)了自動(dòng)化。人多能干細(xì)胞可以常規(guī)培養(yǎng)為單細(xì)胞而不添加ROCKi。MX521還支持hES和iPS細(xì)胞的有效克隆存活和擴(kuò)增，極大地促進(jìn)了多能細(xì)胞中基因組改變和操作的研究。此外，使特定組織細(xì)胞更有效地重編程為iPSC。

與基于飼養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)系統(tǒng)相比，Biolaminin 521底物更靈活，更易于使用且更省力，并且符合任何市售的無(wú)血清培養(yǎng)基。細(xì)胞以均勻的單層生長(zhǎng)，易于監(jiān)測(cè)，具有保持多能性和遺傳完整性。強(qiáng)大而靈活的文化環(huán)境允許獨(dú)立于操作員的文化維護(hù)和可靠的標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)議，可輕松適應(yīng)自動(dòng)化平臺(tái)。

出生后，層粘連蛋白521代表體內(nèi)常見(jiàn)的層粘連蛋白之一，并與其他層粘連蛋白同種型一起，它支持許多不同組織細(xì)胞類(lèi)型的有效擴(kuò)增和分化。

詳細(xì)了解不同的層粘連蛋白細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用

下載細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用海報(bào)

人類(lèi)干細(xì)胞培養(yǎng)

在
生物相關(guān)和無(wú)動(dòng)物成分的環(huán)境中  容易地培養(yǎng)人ES和iPS細(xì)胞

克隆細(xì)胞培養(yǎng)

有效的克隆培養(yǎng)和
人多能干細(xì)胞的  衍生

涂層板

請(qǐng)參閱涂層方案說(shuō)明，推薦的涂層體積和濃度。

MX521上的HPSC文化

參見(jiàn) Biolaminin 521上干細(xì)胞培養(yǎng)的說(shuō)明，包括：- 轉(zhuǎn)移- 傳代- 解凍  - 在MX521上冷凍保存hPSC。  


 

胚胎體形成

在Biolaminin 521底物上培養(yǎng)的hPSC形成胚狀體的方案

重要筆記

• “僅供研究使用”

• 避免蛋白質(zhì)長(zhǎng)時(shí)間暴露在環(huán)境溫度下

• 根據(jù)ISCT指導(dǎo)文件“ISCT無(wú)動(dòng)物源調(diào)查結(jié)果 - 摘要”，CT521是動(dòng)物來(lái)源免于中學(xué)水平。

• 當(dāng)在-20°C至-80°C下儲(chǔ)存時(shí)，層粘連蛋白原液可穩(wěn)定3年。當(dāng)在無(wú)菌條件下在+ 2°C至+ 8°C下儲(chǔ)存時(shí)，解凍的未稀釋的層粘連蛋白原液可穩(wěn)定至少3個(gè)月。

• 應(yīng)避免反復(fù)凍融。如果需要，可以將層粘連蛋白原液分配到工作等分試樣中并儲(chǔ)存在-20℃至-80℃。

• 為方便起見(jiàn)，無(wú)菌保存在+ 2°C至+ 8°C時(shí)，涂層板可保存長(zhǎng)達(dá)4周

• 通過(guò)選擇培養(yǎng)基和解離試劑，可以輕松*定義和無(wú)異種方案

• 轉(zhuǎn)移到MX521基質(zhì)的細(xì)胞具有高質(zhì)量是很重要的

• 轉(zhuǎn)移到MX521基質(zhì)的一些hPSC細(xì)胞系可能需要適應(yīng)期才能根據(jù)單細(xì)胞傳代方案進(jìn)行培養(yǎng)

• 一旦適應(yīng)MX521基質(zhì)，hPSC可以常規(guī)培養(yǎng)為不含ROCKi的單細(xì)胞

故障排除

Biolaminin板涂層

不均勻的細(xì)胞擴(kuò)散，通常是涂層問(wèn)題，可能由以下原因引起：

• 使用的涂料濃度低。增加涂層濃度足以支持均勻的細(xì)胞生長(zhǎng)。
• 涂層覆蓋率差/板已干燥。在制備新鮮板時(shí)，確保層粘連蛋白涂層溶液覆蓋整個(gè)表面。此外，不要讓板干燥，因?yàn)檫@會(huì)使層粘連蛋白涂層失活。在沒(méi)有密封的情況下，在培養(yǎng)箱中長(zhǎng)時(shí)間存放或長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)導(dǎo)致過(guò)多的蒸發(fā)，從而使部分板干燥（通常在中心）。

 
從其他基材轉(zhuǎn)移

• 我們建議將細(xì)胞轉(zhuǎn)移為單個(gè)細(xì)胞（或小團(tuán)塊），并且在初的幾（3-5）次傳代中始終加入ROCKi。一旦細(xì)胞適應(yīng)MX521基質(zhì)，細(xì)胞可以作為沒(méi)有ROCKi的單細(xì)胞培養(yǎng)。這可能需要多達(dá)5個(gè)段落。
• 如果細(xì)胞難以適應(yīng)，嘗試將包衣濃度增加至10ug / ml并以更高的細(xì)胞密度接種50,000-100,1000個(gè)細(xì)胞/ cm ²。一旦細(xì)胞適應(yīng)，通常可以使用較低的包衣和接種濃度。
• 轉(zhuǎn)移到MX521基質(zhì)的細(xì)胞具有高質(zhì)量是很重要的。MX521通常也會(huì)支持分化細(xì)胞，因此請(qǐng)仔細(xì)選擇未分化的細(xì)胞區(qū)域進(jìn)行轉(zhuǎn)移。
• MX521與大多數(shù)商業(yè)媒體品牌結(jié)合使用效果很好。然而，可以預(yù)期細(xì)胞形態(tài)將根據(jù)用于培養(yǎng)的培養(yǎng)基而看起來(lái)不同。

hPSC分裂和播種

• 我們建議將單細(xì)胞傳代或傳代作為小團(tuán)塊。
• 干細(xì)胞是敏感的，當(dāng)使用酶時(shí)，不要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行太長(zhǎng)時(shí)間處理，因?yàn)檫@樣會(huì)破壞細(xì)胞。與其他基質(zhì)相比，細(xì)胞在層粘連蛋白上更緊密地附著，并且在沒(méi)有首先松散細(xì)胞的情況下刮擦或移液可以影響細(xì)胞完整性和活力，這可能導(dǎo)致第二天較少的附著。較少融合的細(xì)胞需要較短的治療時(shí)間，而更融合的細(xì)胞可能需要更長(zhǎng)的治療時(shí)間。細(xì)胞應(yīng)易于分離，無(wú)需過(guò)多移液。不要使用過(guò)多的機(jī)械力（大量移液或刮擦），否則會(huì)損壞細(xì)胞。增加解離試劑的孵育時(shí)間而不是增加力。如果細(xì)胞非常堅(jiān)硬地粘附在MX521表面上，請(qǐng)嘗試降低涂層濃度。
• 播種后：大多數(shù)細(xì)胞應(yīng)在1小時(shí)后附著，細(xì)胞應(yīng)均勻分布在整個(gè)平板上。如果接種后細(xì)胞死亡很多，那么在分裂過(guò)程中細(xì)胞很可能被治療過(guò)于嚴(yán)厲。
• 接種后第二天：細(xì)胞已經(jīng)遷移并且應(yīng)該形成小的集落并且將繼續(xù)作為同質(zhì)單層擴(kuò)增。當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)物為60-99％匯合時(shí)，在MX521基質(zhì)上培養(yǎng)的細(xì)胞準(zhǔn)備好傳代。取決于細(xì)胞系，接種密度和使用的培養(yǎng)基，培養(yǎng)物通常在接種后3-6天傳代。