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laebio K007說明書

更新時間:2019-03-03點擊次數:2197

 

laebio K007說明書

 

Sumoylation Control Kits 
Catalog # K007 supplied with proteins

 

描述:
該檢測試劑盒含有用于常規(guī)檢測SUMO化活性的試劑。包括Sumoylation標記(人拓撲異構酶I蛋白)以允許清楚地檢測反應。已經證明該測定法適用于粗提物。強烈建議將人類EI,活性物質(Cat#P001; P006),人類E II,活性物質(Cat#P002; P011)和人類SUMO I,活性物質(Cat#P003; P012)與此試劑盒一起使用。

K007套件包含:

  • SAE I和SAE II(人類EI)(Cat#P006)
  • UBC9(人類E II)(Cat#P011)
  • SUMO I(活動形式)。(Cat#P012)
  • 人DNA拓撲異構酶I片段。(Cat#B007)
  • 抗拓撲異構酶I抗體。(Cat#AP006)(凍干的抗體應在使用前用100ul H 2 O 重構。)
  • 10X的SUMO化反應緩沖液。(Cat#B006)(10x緩沖液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl 2和20mM ATP。)

上述試劑適用于50次SUMO化反應。

 

測定條件:
SUMO化測定在20微升的終體積中含有20mM的Hepes pH為7.5,5mM的氯化鎂反應緩沖液中進行2,2mM的ATP。我們建議添加新鮮的2mM ATP以確保提供足夠的能量。

拓撲異構酶I Sumoylation Control Protocol:

  1. 加入2ul 50kd拓撲異構酶I片段(Cat#B007)作為每個反應的底物。
  2. 在每個反應中,首先向底物中加入2ul E2,然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反應緩沖液(Cat#B006),2ul E1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使總體積達到20μl 
  3. LAE SUMO化蛋白的宜反應濃度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml
          為對照測定的推薦條件是37 ø 30?60分鐘c。。
     
  4. 在10 ml(Cat#AP006)中使用1000倍稀釋的提供的拓撲異構酶I抗體進行免疫印跡。應檢測四個主要的sumoylated波段。

使用Topo-1抗體(cat#AP006)的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白(cat#B007)的Western印跡(12.5%凝膠)。泳道1:sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2:未經過酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-1抗體( Cat#AP006)可檢測至少四個主要的SUMO化Topo-1片段 。

 

Sumoylation Protocol:

  1. 準備合適的純化底物蛋白。
  2. 在每個反應中,首先向底物中加入2μlE2,然后加入2μlSy,2μl10μl反應緩沖液,2μlE1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使終體積達到20μl。
  3. LAE蛋白的宜反應濃度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml

 

運輸/儲存:
此套件隨附干冰,應儲存在-70 o C或更低溫度。  

法律考慮:僅供研究使用。

 

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laebio K007說明書

 

Sumoylation Control Kits 
Catalog # K007 supplied with proteins

 

描述:
該檢測試劑盒含有用于常規(guī)檢測SUMO化活性的試劑。包括Sumoylation標記(人拓撲異構酶I蛋白)以允許清楚地檢測反應。已經證明該測定法適用于粗提物。強烈建議將人類EI,活性物質(Cat#P001; P006),人類E II,活性物質(Cat#P002; P011)和人類SUMO I,活性物質(Cat#P003; P012)與此試劑盒一起使用。

K007套件包含:

  • SAE I和SAE II(人類EI)(Cat#P006)
  • UBC9(人類E II)(Cat#P011)
  • SUMO I(活動形式)。(Cat#P012)
  • 人DNA拓撲異構酶I片段。(Cat#B007)
  • 抗拓撲異構酶I抗體。(Cat#AP006)(凍干的抗體應在使用前用100ul H 2 O 重構。)
  • 10X的SUMO化反應緩沖液。(Cat#B006)(10x緩沖液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl 2和20mM ATP。)

上述試劑適用于50次SUMO化反應。

 

測定條件:
SUMO化測定在20微升的終體積中含有20mM的Hepes pH為7.5,5mM的氯化鎂反應緩沖液中進行2,2mM的ATP。我們建議添加新鮮的2mM ATP以確保提供足夠的能量。

拓撲異構酶I Sumoylation Control Protocol:

  1. 加入2ul 50kd拓撲異構酶I片段(Cat#B007)作為每個反應的底物。
  2. 在每個反應中,首先向底物中加入2ul E2,然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反應緩沖液(Cat#B006),2ul E1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使總體積達到20μl 
  3. LAE SUMO化蛋白的宜反應濃度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml
          為對照測定的推薦條件是37 ø 30?60分鐘c。。
     
  4. 在10 ml(Cat#AP006)中使用1000倍稀釋的提供的拓撲異構酶I抗體進行免疫印跡。應檢測四個主要的sumoylated波段。

使用Topo-1抗體(cat#AP006)的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白(cat#B007)的Western印跡(12.5%凝膠)。泳道1:sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2:未經過酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-1抗體( Cat#AP006)可檢測至少四個主要的SUMO化Topo-1片段 。

 

Sumoylation Protocol:

  1. 準備合適的純化底物蛋白。
  2. 在每個反應中,首先向底物中加入2μlE2,然后加入2μlSy,2μl10μl反應緩沖液,2μlE1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使終體積達到20μl。
  3. LAE蛋白的宜反應濃度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml

 

運輸/儲存:
此套件隨附干冰,應儲存在-70 o C或更低溫度。  

法律考慮:僅供研究使用。

 

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